最近我實驗在做LDL的分離,使用超高速離心機和兩種不同密度的溴化鈉即可完成。唯時間耗費很長。此實驗是一種介於體內和體外的實驗(extra-vivo)。而且純化的LDL要在短時間使用完,不能放太久也不能存放在冷凍的狀況下,這幾點是這個實驗的限制因子。
根據脂蛋白顆粒的大小及其密度分類,即根據在特定的鹽密度內的漂浮行為,用超速離心技術可把血漿脂蛋白分成四大族:
乳糜微粒(chylomicron, CM):d<
極低密度脂蛋白(VLDL):d=0.95~
低密度脂蛋白(LDL):d=1.006~
高密度脂蛋白(HDL):d=1.063~
2 則留言:
再放入離心機時,要注意管子要兩兩平衡至小數第三位,而平衡時有點需要注意,NaBr的密度不是1,因此需要換算一下(除以密度)。
LDL 純化實驗室首先加入5:1 密度1.097的NaBr,超高速離心後去除上清液(VLDL、IDL),接著加入密度1.283的NaBr,再次超高速離心,上清液即我們要的LDL。
張貼留言